Development and ELISA-based detection of anti-M2e IgY antibodies using an encoding plasmid for M2e-Hsp70 C-terminal gene

Authors

1 گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران

2 استاد ممتاز دانشگاه تهران و عضو پیوسته فرهنگستان علوم

3 آزمایشگاه مرکز تشخیص سازمان دامپزشکی ایران

Abstract

Background: The use of IgYs in a variety of methods in different areas of research, diagnostics, medical application and biotechnology should be considered widely. Objectives: Development of antibodies against extra cellular domain of influenza M2 (M2e) protein in egg yolk of laying hens. Methods: A Fusion construct harboring C-terminal of bovine heat shock protein 70 (Hsp70) and influenza M2e coding genes was injected to laying hens. Serum and egg yolk antibodies were screened for the presence of anti-M2e antibodies by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results: Anti-M2e antibodies were detected in egg yolks and sera of injected hens from 13 and 7 days post injection (PI), with the peak titer detected on 41 and 35 days PI, respectively. Conclusions: Anti-M2e IgY titers could be an index for expression potential of pcDNA3.1-M2e-HspC-terminal construct in laying hens. This construct could be considered as a promising tool in production of anti-M2e polyclonal, monospecific IgY antibodies. Such anti-M2e antibodies could be exploited for influenza diagnostic and therapeutic measures.

Keywords


Article Title [فارسی]

تهیه آنتی بادی های زرده تخم مرغ بر ضد آنتی ژن e2M آنفولانزای طیور با استفاده از ژن ‌ C-terminal 70e-Hsp2M و تشخیص آن با روش الیزا

Authors [فارسی]

  • gholamraza nikbakhat 1
  • غلامرضا نیکبخت 1
  • حسن تاج‌بخش 2
  • منیره جهان‌تیغ 1
  • سیاوش نیازی 3
  • امید مددگار 1
Abstract [فارسی]

زمینه مطالعه: استفاده از آنتی بادی های زرده ‌(IgY)‌ به جهت کاربردهای متنوع تشخیصی، درمانی و همچنین تحقیقاتی و بیوتکنولوژی مورد توجه روز افزون قرار گرفته است. هدف:‌ ‌در این مطالعه تولید آنتی بادی ضد پپتید e2M ‌ آنفلوانزای طیور در زرده تخم‌مرغ بررسی گردید. روش کار:‌ ‌پلاسمید حاوی قطعه کد کننده e2M و بخش انتهایی کربوکسیل پروتئین شوک حرارتی70 به عضله سینه مرغ‌های تخم گذار تزریق شد. سرم و زرده تخم مرغ از نظر وجود آنتی بادی‌های ضد e2M توسط آزمون الایزای غیر مستقیم مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج: حضور آنتی بادی‌های ضد e2M در نمونه های زرده و سرم مرغ ها به ترتیب از روز 13 و 7 بعد از تزریق مورد سنجش قرار گرفتند و بیشترین مقدار آنتی بادی به ترتیب در روزهای 41 و 35 مشاهده شد. نتیجه گیری نهایی: تولید آنتی بادی های ضد e2M در مرغ‌های تخم‌گذار امکان استفاده از ساختار پلاسمیدی e-HspC-terminal2M جهت ایمن سازی رانشان می‌دهد و ابزار مناسبی برای تهیه آنتی بادی های پلی کلنال و اختصاصی بر علیه این آنتی ژن است. این آنتی بادی‌ها برای اهداف تشخیصی و درمانی آنفولانزا کار برد دارند.‌