The Inhibitory Effect of Camel Lactoferrin-chimera, a Recombinant Antimicrobial Peptide, on Avian Influenza Virus Subtype H9N2

Document Type : Original Articles

Authors

1 Department of Avian Diseases, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran.

2 Department of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran.

3 Department of Clinical Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran.

4 Department of Pathobiology, School of Veterinary Medicine, Lorestan University, Khorramabad, Iran.

10.32598/ijvm.19.2.1005499

Abstract

Background: Avian influenza subtype H9N2 is poultry’s most prevalent influenza virus worldwide. It imposes economic losses to the poultry industry and has zoonotic potential. Currently, the two main groups of anti-influenza drugs are adamantanes and neuraminidase inhibitors. In recent years, there has been an increase in the resistance to existing anti-influenza drugs. Antimicrobial peptides are a group of potential drug candidates with broad-spectrum activity. Camel lactoferrin (cLF)-chimera is an antimicrobial peptide synthesized from camel milk lactoferrin. 
Objectives: This study aims to evaluate the inhibitory effects of cLF-chimera on avian influenza, subtype H9N2. 
Methods: One hundred and seventy 11-day-old specific pathogen-free (SPF) embryonated eggs were randomly distributed into 17 groups. Different virus and peptide concentrations were injected into the eggs. The eggs were incubated for four days, and daily candling was done for viability assessment. On the 4th day of incubation, each group’s live or dead embryos were sorted and evaluated for gross anomalies. Next, for histopathological analysis, chick embryos were fixed with 10% neutral buffered formalin for one week. The 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay was performed to determine peptide and virus concentrations. 
Results: Embryo viability results and macroscopic and histopathologic findings showed that the peptide had inhibitory effects against the virus. These results are consistent with the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide) (MTT) assay. Moreover, the peptide has proven effects against pathogenic bacteria, which can be advantageous compared to common anti-influenza medications. 
Conclusion: According to the results, cLF-chimera has an inhibitory effect on the H9N2 influenza virus.

Keywords


Article Title [Persian]

اثر بازدارندگی cLF-chimera، یک پپتید ضدمیکروب نوترکیب، بر ویروس آنفولانزای پرندگان، تحت تیپ H9N2

Authors [Persian]

  • معین خدایاری 1
  • محمد هادی سخاوتی 2
  • سید مصطفی پیغمبری 1
  • عباس برین 3
  • امید دزفولیان 4
  • جمشید رزمیار 1
1 گروه بیماریهای پرندگان، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران.
2 گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران.
3 گروه آسیب شناسی بالینی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران.
4 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه لرستان، خرم آباد، ایران.
Abstract [Persian]

زمینه مطالعه: ویروس آنفولانزای پرندگان تحت تیپ H9N2 شایع‌ترین تحت تیپ ویروس آنفولانزا در ماکیان سراسر جهان است. این تحت تیپ باعث ایجاد ضررهای اقتصادی به صنعت پرورش ماکیان شده و قابلیت سرایت به انسان را دارد. در حال حاضر 2 گروه عمده داروهای ضدآنفولانزا یعنی آدامانتان‌ها و مهار کننده‌های نورآمینیداز برای درمان این تحت تیپ در حال استفاده هستند. پپتیدهای ضدمیکروب که در سالیان اخیر استفاده از آن‌ها به دلیل مقاومت نسبت به داروهای ضدآنفولانزا رو به افزایش بوده‌است، دسته‌ای از ترکیبات کاندید احتمالی برای درمان آنفولانزا با طیف اثر وسیع هستند. cLF-chimera یک پپتید ضد‌میکروب است که از لاکتوفرین شیر شتر سنتز شده‌است.
هدف: هدف این مطالعه بررسی اثرات بازدارندگی cLF-chimera بر روی تحت تیپ H9N2 ویروس آنفولانزای پرندگان می‌باشد. 
روش کار: برای این منظور 170 عدد تخم‌مرغ جنین‌دار 11 روزه SPF به طور تصادفی در 17 گروه توزیع شدند. غلظت‌های مختلف پپتید و ویروس به تخم‌مرغ‌ها تزریق شده و تخم‌مرغ‌ها به مدت 4 روزهمراه با کندلینگ روزانه به منظور بررسی میزان زنده‌مانی جنین‌ها انکوبه شدند. در روز چهارم، جنین‌های زنده و مرده در هر گروه جدا شده و از لحاظ وجود ضایعات ماکروسکوپیک ارزیابی شدند. سپس برای مطالعات هیستوپاتولوژیک، جنین‌ها به مدت یک هفته در فرمالین 10% نگهداری شدند. همچنین تست MTT هم برای غلظت‌های مختلف ویروس و پپتید انجام شد.
نتایج: روی هم رفته نتایج مربوط به درصد زنده‌مانی جنین‌ها، ارزیابی‌های ماکروسکوپیک و هیستوپاتولوژیک نشان دادند که پپتید دارای اثرات بازدارندگی علیه ویروس می‌باشد. این نتایج با نتایج حاصل از تست MTT تایید‌ شدند. علاوه‌بر‌این، پپتید دارای اثرات ضد‌میکروبی علیه باکتری‌های پاتوژن می‌باشد که در مقایسه با داروهای ضدآنفولانزای رایج می‌تواند به عنوان یک مزیت درنظر گرفته‌شود. 
نتیجه‌گیری نهایی: طبق نتایج ذکر‌شده، cLF-chimea دارای اثر بازدارندگی علیه ویروس آنفولانزای تحت تیپ H9N2 می‌باشد.

Keywords [Persian]

  • آنفولانزای پرندگان
  • پپتید ضد‌میکروب
  • تحت تیپ H9N2
  • هیستوپاتولوژی
  • cLF-chimera