The Inhibitory Effect of cLF-chimera, a Recombinant Antimicrobial Peptide, on Avian Influenza Virus Subtype H9N2

Document Type : Original Articles

Authors

1 Department of Avian Diseases, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran

2 Departmen of Animal Science, Faculty of Agriculture, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran

3 Department of Avian Diseases Faculty of Veterinary Medicine University of Tehran Tehran, Iran

4 Department of Clinical Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran

5 Department of Pathobiology, School of Veterinary Medicine, Lorestan University, Khorramabad, Iran

Abstract

Avian influenza subtype H9N2 is the most prevalent influenza virus in poultry worldwide. It imposes economic losses on the poultry industry and has zoonotic potential. Currently, there are two main groups of anti-influenza drugs in use; Adamantanes and Neuraminidase inhibitors. In recent years, there has been increasing resistance to existing anti-influenza drugs. Antimicrobial peptides are a group of potential drug candidates with broad-spectrum activity. cLF-chimera is an antimicrobial peptide synthesized from camel milk lactoferrin. This study's objective is to evaluate the inhibitory effects of cLF-chimera on avian influenza, subtype H9N2. For this purpose, one hundred and seventy 11-day-old SPF embryonated eggs were randomly distributed in 17 groups. Different virus and peptide concentrations were injected into the eggs. The eggs were incubated for four days with daily candling for viability assessment. On the 4th day of incubation, each group's alive or dead embryos were sorted and evaluated for gross anomalies. Next, the chick embryos were fixed with 10% neutral buffered formalin for one week for histopathological studies. The MTT assay was also performed for the peptide and virus concentrations. Overall, the embryo viability results and macroscopic and histopathologic findings showed that the peptide has inhibitory effects against the virus. These findings agree with the MTT assay. Moreover, the peptide has proven effects against pathogenic bacteria that can be advantageous compared to common anti-influenza medications. According to the results, cLF-chimera has an inhibitory effect on the H9N2 influenza virus.

Keywords


Article Title [Persian]

اثر بازدارندگی cLF-chimera، یک پپتید ضدمیکروب نوترکیب، بر ویروس آنفلوانزای پرندگان، تحت تیپ H9N2

Authors [Persian]

  • معین خدایاری 1
  • محمد هادی سخاوتی 2
  • سید مصطفی پیغمبری 3
  • عباس برین 4
  • امید دزفولیان 5
  • جمشید رزمیار 1
1 گروه بیماریهای پرندگان، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران
2 گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی دانشگاه فردوسی، مشهد، ایران
3 گروه بیماریهای پرندگان، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران
4 گروه کلینیکال پاتولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران
5 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه لرستان، خرمآباد، ایران
Abstract [Persian]

زمینه مطالعه: ویروس آنفلوانزای پرندگان تحت تیپ H9N2 شایع‌ترین تحت تیپ ویروس  آنفلوانزا در ماکیان سراسر جهان است. این تحت تیپ باعث ایجاد ضررهای اقتصادی به صنعت پرورش ماکیان شده و قابلیت سرایت به انسان را دارد. در حال حاضر 2 گروه عمده داروهای ضدآنفولانزا یعنی آدامانتان‌ها و مهار کننده‌های نورآمینیداز برای درمان این تحت تیپ در حال استفاده هستند. پپتیدهای ضدمیکروب که در سالیان اخیر استفاده از آن‌ها به دلیل مقاومت نسبت به داروهای ضد آنفلوانزا رو به افزایش بوده‌است، دسته‌ای از ترکیبات کاندید احتمالی برای درمان آنفلوانزا با طیف اثر وسیع هستند. cLF-chimera یک پپتید ضد‌میکروب است که از لاکتوفرین شیر شتر سنتز شده‌است.

هدف: هدف این مطالعه بررسی اثرات بازدارندگی cLF-chimera بر روی تحت تیپ H9N2 ویروس  آنفلوانزای پرندگان می‌باشد.

روش کار: برای این منظور 170 عدد تخم‌مرغ جنین‌دار 11 روزه SPF به طور تصادفی در 17 گروه توزیع شدند. غلظت‌های مختلف پپتید و ویروس به تخم‌مرغ‌ها تزریق شده و تخم‌مرغ‌ها به مدت 4 روزهمراه با کندلینگ روزانه به منظور بررسی میزان زنده‌مانی جنین‌ها انکوبه شدند. در روز چهارم، جنین‌های زنده و مرده در هر گروه جدا شده و از لحاظ وجود ضایعات ماکروسکوپیک ارزیابی شدند. سپس برای مطالعات هیستوپاتولوژیک، جنین‌ها به مدت یک هفته در فرمالین 10% نگهداری شدند. همچنین تست MTT هم برای غلظت‌های مختلف ویروس و پپتید انجام شد.

نتایج: روی هم رفته نتایج مربوط به درصد زنده‌مانی جنین‌ها، ارزیابی‌های ماکروسکوپیک و هیستوپاتولوژیک نشان دادند که پپتید دارای اثرات بازدارندگی علیه ویروس می‌باشد. این نتایج با نتایج حاصل از تست MTT تایید‌شدند. علاوه‌بر‌این، پپتید دارای اثرات ضد‌میکروبی علیه باکتری‌های پاتوژن می‌باشد که در مقایسه با داروهای ضد آنفلوانزای رایج می‌تواند به عنوان یک مزیت درنظر گرفته‌شود.

نتیجه گیری نهایی: طبق نتایج ذکر‌شده، cLF-chimea دارای اثر بازدارندگی علیه ویروس  آنفلوانزای تحت تیپ H9N2 می‌باشد.

Keywords [Persian]

  • آنفلوانزای پرندگان
  • پپتید ضد‌میکروب
  • تحت تیپ H9N2
  • هیستوپاتولوژی
  • cLF-chimera