Comparison the Efficiency of Three Staining Methods Including Giemsa, Leishman and Leishman-Giemsa for Evaluation Fish Blood Smear

Document Type : Original Articles

Authors

1 Graduated from the Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran.

2 Department of Aquatic Animal Health and Diseases, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran

3 Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran

Abstract

Backgrounds: The haematological panel provides valuable information about the physiologic status and health of the fish in the aquatic expert's test through the optimal staining of the nucleus, cytoplasm, and cytoplasmic granules.
Objectives: Our research focused on creating a new Leishman-Giemsa dye mixture specifically for fish blood smears and evaluating its effectiveness compared to standard staining techniques.

Methods: Blood samples were taken from 20 healthy common carp to produce three groups of peripheral blood smears: one for Leishman-Giemsa dye and two for Leishman's and Giemsa's stains. Two experienced clinical pathologists extensively examined all three types of blood smears based on four staining characteristics: nuclear characteristics of erythrocytes and leukocytes, cytoplasmic characteristics, and leukocyte granulation. Two experts' mean ratings for each staining technique were compared.
Results: Regarding RBC and WBC nuclei characteristics, the two conventional Leishman and Giemsa staining methods yielded substantially lower mean scores than the new Leishman-Giemsa staining method (P<0.05). Leishman-Giemsa staining enhanced the clarity of RBC and WBC nuclear characteristics. The new Leishman-Giemsa staining technique resulted in a statistically significant (P<0.05) difference in the cytoplasmic characteristics of fish WBC compared to the other two methods.
Conclusion: This study's results demonstrated for the first time that fish blood cells stained with the novel Leishman-Giemsa method are more desirable. In addition, its nuclear and cytoplasmic staining is superior to conventional Giemsa and Leishman stains when used separately. The Leishman-Giemsa cocktail has a high index for air-dried smear discolouration.

Keywords


Article Title [Persian]

مقایسه سه روش رنگ آمیزی لشمن، گیمسا و لیشمن-گیمسا جهت ارزیابی گسترش خونی در ماهی

Authors [Persian]

  • احسان آرون 1
  • سارا مهدی زاده مود 2
  • محمود احمدی همدانی 3
1 دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران.
2 گروه بهداشت و بیماری های آبزیان، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران.
3 گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران.
Abstract [Persian]

زمینه مطالعه : تابلوی خون شناسی اطلاعات مفیدی را در خصوص وضعیت فیزبولوژیک و سلامت ماهی در اختبار متخصص آبزیان قرار می دهد. این مهم از طریق رنگ آمیزی مطلوب هسته، سیتوپلاسم و گرانول های سیتوپلاسمی صورت می پذیرد.
هدف: تحقیق حاضر با هدف ایجاد ترکیبی جدید از رنگ لیشمن-گیمسا برای نمونه‌های گسترش خون ماهی و مقایسه کارایی آن با تکنیک‌های رنگ‌آمیزی مرسوم انجام شد.
روش کار: از 20 ماهی کپور معمولی نمونه خون برای تهیه سه گروه گسترش خون محیطی: یک گسترش برای رنگ لیشمن-گیمسا و دو لام برای رنگ آمیزی لیشمن و گیمسا گرفته شد. دو پاتولوژیست بالینی متخصص، هر سه سری گسترش خون را بر اساس چهار ویژگی رنگ‌آمیزی ارزیابی کردند: ویژگی‌های هسته‌ای گلبول‌های قرمز (RBC) و گلبول‌های سفید (WBC)، ویژگی‌های سیتوپلاسمی، و گرانول های WBC. میانگین امتیازات دو متخصص برای هر تکنیک رنگ آمیزی مقایسه شد.
نتایج: از نظر ویژگی‌های هسته‌های RBC و WBC، میانگین امتیازات دو روش رنگ‌آمیزی مرسوم لیشمن و گیمسا نسبت به روش جدید رنگ‌آمیزی لیشمن-گیمسا امتیاز پایین تری داشتند (05/0P<). رنگ‌آمیزی لیشمن-گیمسا شفافیت و وضوح ویژگی‌های هسته‌ای RBC و WBC را افزایش داد. روش جدید رنگ‌آمیزی لیشمن-گیمسا منجر به تفاوت معنی‌دار آماری (P<0.05) در ویژگی‌های سیتوپلاسمی WBC ماهی در مقایسه با دو روش دیگر شد.
نتیجه گیری نهایی: نتایج این مطالعه برای اولین بار نشان داد که سلول‌های خون ماهی رنگ‌آمیزی شده با روش جدید لیشمن-گیمسا مطلوب‌تر است. علاوه بر این، رنگ آمیزی هسته ای و سیتوپلاسمی آن نسبت به رنگ آمیزی های معمولی گیمسا و لیشمن در صورت استفاده جداگانه برتری دارد. ترکیب لیشمن - گیمسا دارای شاخص بالایی برای تغییر رنگ لام خشک شده در هوا داشت.

Keywords [Persian]

  • ماهی کپور
  • گرانول های سیتوپلاسمی
  • ارزیابی خون شناسی
  • ویژگی های هسته
  • رنگ آمیزی لیشمن- گیمسا