Document Type : Original Articles
Authors
1
Department of Avian Health and Diseases, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
2
Department of Animal Science, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran
3
Department of Microbiology and Virology, School of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
10.22059/ijvm.2023.362483.1005421
Abstract
Abstract
Background: The H9N2 influenza virus is one of the most important subtypes of influenza that has caused irreparable damage to the poultry industry, and many efforts are underway to develop its recombinant vaccines.
Objectives: The aim of this study was to evaluate the effectiveness of H9-RBD-Pichia, a novel recombinant subunit vaccine, in stimulating the immune system and producing hemagglutinin-inhibiting antibodies in mice.
Methods: 24 female BALB/c mice were purchased and randomly divided into six groups. Group 1: Oral administration of lysed yeast twice. Group 2: One injection of lysed yeast. Group 3: Two injections of lysed yeast. Group 4: One injection of pure recombinant protein. Group 5: Two injections of pure recombinant protein, and Group 6: Negative control. Prime and booster immunizations and sera collection were performed on days 14, 28, and 42, respectively. Hemagglutination Assay (HA) and Hemagglutination Inhibition (HI) assays were performed on antigen and sera samples, respectively.
Results: HA titers of 1:4, 1:4, and 1:32 were seen in the positive control, intact, and bead-treated yeasts, respectively, which shows the functionality of the expressed H9-RBD recombinant protein. By performing the HI assay, it was observed that this vaccine could stimulate the immune system and produce anti-hemagglutinin antibodies in mice. The highest antibody titer (1:512) was observed when yeast lysate was injected twice on days 14 and 28.
Conclusions: The H9-RBD-Pichia vaccine has been produced based on genetic engineering technology and could produce high titers of hemagglutinin-inhibiting antibodies in mice.
Keywords: H9N2, influenza, Pichia pastoris, recombinant vaccine, surface display.
Keywords
Article Title [Persian]
ارزیابی سرولوژیکی H9-RBD-Pichia، یک واکسن نوترکیب جدید آنفلوانزا، در موش BALB/c
Authors [Persian]
-
امیر اصغری باغخیراتی
1
-
محمد هادی سخاوتی
2
-
سید مصطفی پیغمبری
1
-
کیارش قزوینی
3
-
جمشید رزمیار
1
1
گروه بهداشت و بیماری های پرندگان، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران
2
گروه علوم دامی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه فردوسی مشهد، مشهد، ایران.
3
مرکز تحقیقات مقاومت آنتی بیوتیکی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران
Abstract [Persian]
چکیده:
زمینه: ویروس آنفولانزای H9N2 یکی از مهمترین تحت تیپ‌های آنفلوانزا است که خسارات جبران‌ناپذیری به صنعت طیور وارد کرده است و تلاش‌های زیادی برای تولید واکسن‌های نوترکیب آن در حال انجام است.
هدف: هدف از این مطالعه بررسی اثربخشی واکسن جدید زیرواحد نوترکیب H9-RBD-Pichia در تحریک سیستم ایمنی و تولید آنتی‌بادی‌های مهارکننده هماگلوتینین در موش است.
روش کار: 24 موش ماده BALB/c خریداری و به طور تصادفی به شش گروه تقسیم شدند. گروه 1: دوبار تجویز خوراکی مخمر لیز شده. گروه 2: یکبار تزریق مخمر لیز شده. گروه 3: دوبار تزریق مخمر لیز شده. گروه 4: یکبار تزریق پروتئین نوترکیب خالص. گروه 5: دوبار تزریق پروتئین نوترکیب خالص و گروه 6: کنترل منفی. واکسیناسیون اولیه و یادآور و جمع آوری سرم به ترتیب در روزهای 14، 28 و 42 انجام شد. آزمایشات هماگلوتیناسیون (HA) و ممانعت ازهماگلوتیناسیون (HI) به ترتیب بر روی نمونه های آنتی ژن و سرم انجام شد.
نتایج: تیترهای HA 1:4، 1:4 و 1:32 به ترتیب در مخمرهای کنترل مثبت، دست نخورده و تیمار شده با گوی شیشه ای مشاهده شد که نشان دهنده ی عملکرد پروتئین نوترکیب H9-RBD بیان شده است. با انجام سنجش HI، مشاهده شد که این واکسن می تواند سیستم ایمنی را تحریک کرده و آنتی بادی های ممانعت کننده از هماگلوتینین را در موش تولید کند. بالاترین تیتر آنتی بادی (1:512) زمانی مشاهده شد که مخمر لیز شده، دو بار در روزهای 14 و 28 تزریق شد.
نتیجه گیری: واکسن H9-RBD-Pichia بر اساس فناوری مهندسی ژنتیک تولید شده است و می تواند تیتر بالایی از آنتی بادی های مهارکننده هماگلوتینین را در موش تولید کند.
کلیدواژه‌ها: H9N2، آنفولانزا، پیکیا پاستوریس، واکسن نوترکیب، نمایش سطحی.
Keywords [Persian]
-
H9N2
-
آنفولانزا
-
پیکیا پاستوریس
-
واکسن نوترکیب
-
نمایش سطحی
)