تشخیص ژن " tim" ژیاردیای گوسفند با استفاده از پرایمرهای ژن " tim" ژیاردیا با منشأ انسانی

نویسندگان

چکیده

ژیاریازیس بیماری مهم انگلی انسان است.ژیاردیا تک یاخته تاژک دار دو هسته ای است.اسپس ژیاردیا دئودنالیس انگل طیف
گسترده ای از مهره داران از جمله انسان می باشد.تنوع ژنتیکی در ژیاردیا دئودنالیس توسط آنالیزهای سرولوژیک ،
بیوشیمیایی و مولکولی نشان داده شده است. در مطالعه حاضر ، احتمال تشابهات ژنتیکی بین ژیاردیای گوسفندی و انسانی و
احتمال زئونوز بودن مورد بررسی قرار گرفت.آزمایش مستقیم و تکنیک تغلیظ به روش فرمل- اتر بر روی محتویات بافتی و
روده ای گوسفند انجام شد. روش گرادیان سوکروز برای جمع آوری و تخلیص کیست ها استفاده گردیدواستخراج DNA با
روش فرمل-اتر انجام گرفت.مقادیر بسیار کمی ازDNA پس از چندین بار ذوب و انجماد و تعلیق بدست آمد.سپس واکنش
زنجیره ای پلیمراز(PCR) برای تکثیر DNA با پرایمرهایی که برای ژیاردیا با منشأ انسانی طراحی شده بود، انجام شد
.ژن ?تریوز فسفات ایزومراز?(tim یا tpi ) بعنوان مارکر مولکولی انتخاب و دو پرایمر(290PM و 924PM) مورد
استفاده قرار گرفتند. در این بررسی 308 نمونه مدفوع گوسفند بررسی شد.تعداد 21 نمونه از نظر ژیاردیا مثبت گردیدند.3
ایزوله گوسفند با پرایمر290PM تکثیر و با آمپلیکون bp290 که مشابه با نوع انسانی است مشخص گردید ند.تشابه ژنی
ژیاردیای گوسفند با نوع انسانی، احتمال انتقال این تک یاخته بین انسان و گوسفند را نشان می دهد.