توسعه سنجش ریزآرایه‌ای آنتی بادی برای تشخیص کمی آفلاتوکسین1B

نویسندگان

گروه بهداشت و کنترل کیفی مواد غذایی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

چکیده

زمینه مطالعه:  آفلاتوکسین ‌1B‌ یک متابولیت بسیار سمی است که توسط گونه های آسپرژیلوس تولید گردیده و طیف وسیعی از محصولات کشاورزی را آلوده می کند. هدف: هدف از این مطاله توسعه یک روش ایمونو اسی سریع و حساس در فرمت ریزآرایه ای به منظور اندازه گیری کمی آفلاتوکسین ‌1B‌ ، در جهت ارزیابی کارایی این روش به منظور توسعه روش‌های غربالگری با کارایی بالا برای استفاده در صنایع مواد غذایی انسانی و دامی بوده است. روش کار:  به دنبال بهینه سازی سنجش با استفاده از تکنیک دات بلات و روش ایمونواسی رقابتی غیرمستقیم،  غلظت بهینه از آفلاتوکسین متصل شده به آلبومین سرم گاوی بر روی 16ساب اری بر روی اسلایده‌های پوشیده شده با نیتروسلولوز پرینت گـردیـده و سنجـش ایمـونـواسی رقابتی اعمال گردید. نتایج: با استفاده از این روش، سنجش آفلاتوکسین در طیف کاری برابر pg/g‌15 تا ng/g04/3 با حد تشخیص pg/g1 تعیین گردید. به منظور ارزیابی کارایی این میکرواری تولید شده در مواد غذایی، آرد گندم به صورت مصنوعی با مقادیر مختلف توکسین آلوده گردید و پس از استخراج، طیف کاری برابر ng/g11/0-15/4 با حد تشخیصی برابر pg/g30 در آرد گندم حاصل گردید. میانگین تخمین بازیافت 9%±94تعیین گردید که نشان دهنده صحت سنجش با استفاده از این روش می‌باشد. این سنجش در مدت زمان3 ساعت تکمیل گردید. نتیجه گیری نهایی: این روش سنجش مطرح شده در فرمت ریزآرایه‌ای می‌تواند به عنوان روش اندازه‌گیری سریع با حساسیت بالا برای سنجش دقیق آفلاتوکسین ‌1B‌ در نمونه‌های گندم به کار رود.
 

کلیدواژه‌ها